Tugas Akhir
Pola agregasi apoferritin sebelum dan sesudah konjugasi antibodi trastuzumab
Konjugasi Apoferritin (APO) dengan mono-klonal antibodi anti HER2, protein Trastuzumab (Tz) menggunakan 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl) carbodiimide (EDC) sebagai crosslinker telah dilakukan dalam membuat nanocarrier bertarget. Kendala yang dapat terjadi selama proses konjugasi yaitu terbentuknya agregasi APO-Tz. Untuk itu, telah dilakukan penelitian untuk mengetahui pola agregasi sebelum dan sesudah konjugasi dengan memvariasikan jumlah crosslinker EDC (0,1 mg/mL; 0,3 mg/mL; 0,5 mg/mL), jenis pelarut (DI Water dan 4-Morpholinoethanesulfonic acid atau MES), pH (5,0; 5,5; 6,0) serta suhu dialisis (23oC dan 4oC). Pola agregasi dari konjugasi APO-Tz dianalisis dari data ukuran dan distribusi ukuran partikel serta nilai Zeta potential larutan APO-Tz menggunakan Particle Size Analyzer (PSA) yang dilengkapi dengan Zeta potential probe, SDS PAGE serta Transmission Electron Microscope (TEM). Ukuran kunjugasi APO-Tz dalam DI Water mengalami kenaikan pada saat proses sintensisnya dan menurun setelah dialisis. Nilai Zeta potensial konjugasi APO-Tz saat proses sintesis mendekati 0 mV yang menunjukkan bahwa APO-Tz lebih mudah beragregasi sehingga ukuran konjugasi APO-Tz menjadi besar (961,27 nm). APO-Tz dalam pelarut MES dengan pH 5,5 memiliki nilai Zeta potensial mendekati 0 mV yang merupakan titik isoelektriknya, sehingga ukuran partikel konjugasi AP-Tz juga menjadi besar. Hasil pengukuran pada APO-Tz dalam pelarut MES 0,01 M dan pH 6 dan suhu dialisis 4ºC, memiliki Zeta potensial yang paling tinggi yaitu (-5 mV). Hal ini menyebabkan partikel konjugasi APO-Tz memiliki ukuran paling kecil (172,8 nm). Hasil tersebut didukung juga dari analisis SDS PAGE dengan adanya pita migrasi protein APO dengan ukuran ~20 kDa, Tz berukuran ~25 kDa dan partikel protein konjugasinya berukuran ~40 kDa serta hasil dari TEM yang menunjukkan adanya partikel APO yang menempel pada gumpalan partikel antibody Tz dalam pelarut MES, pH 6 dan kosentrasi EDC 0,1 mg/mL pada suhu dialisis 4ºC
Kata kunci : APO, Antibodi Trastuzumab, EDC, Agregasi, Konjugasi (5)
S19-0197 | 26/TA/H/19 621.039.1(043) NIN p | Perpustakaan Poltek Nuklir (600) | Tersedia |
Tidak tersedia versi lain